Penyebaran patogen karantina menimbulkan risiko yang signifikan terhadap produksi tanaman global, mengancam kesehatan tanaman dan mengganggu agroekosistem. Deteksi di-lokasi yang tepat waktu dan akurat sangat penting untuk mencegah wabah. Amplifikasi rekombinase polimerase (RPA) dan DNAzyme multikomponen (MNAzyme) merupakan teknologi deteksi isotermal yang menjanjikan; namun, integrasinya terhambat oleh persyaratan DNA untai tunggal (ssDNA) untuk aktivasi MNAzyme, karena RPA menghasilkan DNA untai ganda (dsDNA). Untuk mengatasi hal ini, kami mengembangkan biosensor OAR-MNA, sebuah platform-pot inovatif yang menggabungkan RPA asimetris (aRPA) dengan daur ulang target berbantuan MNAzyme-. Biosensor diterapkan untuk mendeteksi Acidovorax citrulli yang merupakan agen penyebab bakteri bercak buah (BFB) pada mentimun. Dengan menyesuaikan konsentrasi primer RPA, aRPA menghasilkan ssDNA yang melimpah, memungkinkan deteksi visual A. citrulli dengan batas deteksi 20 salinan/μL dan spesifisitas sempurna, melampaui kinerja RPA fluoresen. Biosensor menunjukkan kesesuaian 100% dengan qPCR dalam sampel benih dan mempertahankan kinerja yang kuat dalam homogenat melon berduri. Analisis komparatif kami mengungkapkan keunggulan sistem OAR-MNA, termasuk pengurangan biaya deteksi dan peningkatan penerapan di lapangan. Jika digabungkan dengan penganalisis DNA portabel, biosensor memberikan-hasil yang mudah digunakan (+/−), sehingga ideal untuk penerapan{20}}di lokasi. Di luar BFB
deteksi, OAR-MNA telah berhasil diterapkan untuk mendeteksi virus mosaik belang hijau mentimun (CGMMV), sebuah patogen karantina RNA yang menyebabkan kerugian besar pada produksi tanaman mentimun. Dengan memungkinkan diagnosis-di lokasi secara dini dan akurat, biosensor OAR-MNA mewakili kemajuan dalam teknologi deteksi patogen tanaman, menawarkan alat yang menjanjikan untuk menjaga produksi tanaman global.
